zabika.ru 1







ИНСТРУКЦИЯ

по применению сыворотки сибиреязвенной преципитирующей

из крови лошади
(Организация-производитель: ФГУП «Орловская биофабрика»)
I ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

1. Сыворотка сибиреязвенная преципитирующая из крови лошади (Serum anthracicum preacipitans ex sanguine equi).

2. Сыворотка предназначена для применения с диагностической целью в качестве компонента в реакции преципитации (по Асколи) при исследовании кож и другого патологического материала на сибирскую язву.

3. Сыворотка получена из крови лошадей, гипериммунизированных сиби-реязвенным антигеном, и консервирована фенолом.

4. По внешнему виду сыворотка представляет собой прозрачную жид-кость светло-соломенного цвета с незначительным осадком, легко разбивающимся при встряхивании.

5. Сыворотка расфасована по 50 или 100 см3 в стеклянные флаконы соответствующей вместимости, укупоренные резиновыми пробками, укреплёнными алюминиевыми колпачками.

На флаконах с сывороткой должны быть этикетки, на которых указаны: организация-производитель, её адрес и товарный знак; название сыворотки; объём сыворотки во флаконе (см3); номер государственной регистрации; дата изготовления (месяц, год); номер серии и номер контроля; срок годности (месяц, год); условия хранения; надпись: «Для животных»; знак соответствия по ГОСТ Р 50460; обозначение стандарта; штриховой код.

Флаконы с сывороткой упакованы в ящики из дерева, картона или других материалов. Внутрь каждого ящика вложены не менее пяти экземпляров инструкции по применению сыворотки.

На поверхности транспортной тары или на этикетке указаны: организация-производитель, её адрес и товарный знак; название сыворотки; номер серии; срок годности (месяц, год); надпись «Для животных»; количество флаконов в ящике.


Сыворотку хранят в сухом тёмном месте и транспортируют при температуре от 2 °С до 15 °С. Срок годности сыворотки – 3 года с даты изготовления.

6. Сыворотку во флаконах без этикеток, с нарушением целостности и герметичности укупорки, с изменённым внешним видом, наличием посторонней примеси, плесени, неразбивающихся хлопьев; после замораживания; истечения срока годности; неиспользованную в день вскрытия флакона, выбраковывают и обеззараживают кипячением в течение 30 мин с последующей утилизацией. Так же поступают с флаконами из-под сыворотки.
II БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

7. Сыворотка содержит специфические антитела, позволяющие обнаруживать специфические сибиреязвенные антигены в патологическом материале, когда выделить возбудителя сибирской язвы бактериологическим методом невозможно по причине его разрушения.

8. Сыворотка не обладает лечебными и профилактическими свойствами и предназначена только для постановки реакции преципитации.
III ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ СЫВОРОТКИ

9. Сыворотку применяют с диагностической целью в качестве компонента в реакции преципитации (по Асколи) при исследовании кож и другого патологического материала на сибирскую язву.

10. Отстоявшуюся прозрачную сыворотку используют не допуская встряхивания осадка. Сыворотку с наличием незначительного количества взвеси, образовавшейся после встряхивания, отстаивают не менее 10 сут при температуре от 2 °С до 8 °С. При необходимости срочного использования сыворотку фильтруют через стандартные диски диаметром 25, 35 мм из микропористых капроновых мембран марки «ММК» или асбестоцеллюлозные пластины «СФ», или центрифугируют при относительной центробежной силе (RCF) от 1000 до 1200 об/мин в течение 10 мин, или при использовании микропробирок и центрифуги для них – от 6000 до 15000 об/мин в течение 1,5 мин.

Перед использованием сыворотку контролируют на активность и специфич-ность в реакции преципитации по Асколи с «Антигеном сибиреязвенным бактерийным стандартным», физиологическим раствором и антигенами из кож здоровых животных. Она должна давать положительную реакцию со стандартным антигеном в течение 1 мин и не взаимодействовать с физиологическим раствором и антигенами из кож здоровых животных в течение 15 мин.


При исследовании экстрактов из сухосолёных и мокросолёных кож в преципитирующую сыворотку, для повышения её удельного веса, добавляют 3 % химически чистого натрия хлорида, а при исследовании пресносухих, парных и мороженных кож натрий хлорид не добавляют.

11. Перед исследованием кожи и патологический материал обезвреживают в автоклаве при температуре (1211) °С и давлении 0,1 МПа в течение 1 ч, охлаждают до температуры (191) °С, удаляют волосяной покров, отбирают пробу весом 1-2 г и измельчают её на кусочки размером 3 3 мм.

Экстрагирование преципитиногена проводят «горячим» или «холодным» способами. При этом следует учитывать, что при «горячем» способе экстрагируется меньшее количество преципитиногенов.

Для получения экстрактов из парных, мороженых, пресносухих, сухосолёных кож и патологического материала в качестве экстрагирующей жидкости используют 0,3 %-ный раствор кристаллического фенола в физиологическом растворе, мокросолёных - 0,3 %-ный раствор фенола в дистиллированной воде.

Экстрагирующие жидкости перед использованием проверяют в реакции преципитации. Они не должны давать кольца преципитации в течение 1 ч контакта с сывороткой сибиреязвенной преципитирующей.

При «горячем» способе экстракции в пробирку вносят 1 г исследуемого патологического материала, заливают 10 см3 экстрагирующей жидкости и кипятят в течение 30 – 40 мин в водяной бане.

При «холодном» способе экстракции 1 г патологического материала растирают в ступке с песком, переносят в пробирку, заливают 10 см3 экстрагирующей жидкости и выдерживают в течение 16 - 18 ч при температуре (202) °С.


Полученные экстракты фильтруют до прозрачного состояния через диски диаметром 25, 35 мм из микропористых капроновых мембран марки «ММК» или из асбестоцеллюлозных пластин марки «СФ».

12. Реакцию ставят в пробирках Уленгута методами наслаивания или подслаивания.

При методе наслаивания в пробирку вносят прозрачную сибиреязвенную преципитирующую сыворотку в количестве 0,2 - 0,3 см3, на которую осторожно с помощью пипетки наслаивают равное количество экстракта так, чтобы между компонентами была чётко выраженная граница.

При методе подслаивания в пробирку вносят экстракт патологического материала в количестве 0,2 - 0,3 см3, а затем под него осторожно пипеткой подслаивают равное количество преципитирующей сыворотки.

13. Реакцию преципитации считают положительной, если через 1-2 мин и не позже, чем через 15 мин, на границе между сывороткой и экстрактом появится чётко выраженное тонкое компактное серовато-белое кольцо преципитата.

При отрицательном результате на границе между компонентами признаки преципитации отсутствуют. В случае отрицательного результата реакции преципитации с экстрактом, полученным «горячим» способом, реакцию ставят повторно с экстрактом, полученным «холодным» способом.
IV МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

14. При проведении диагностических исследований необходимо соблюдать правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами для животных.

15. При попадании сыворотки на кожу и слизистые оболочки их необходимо тщательно промыть большим количеством водопроводной воды.

16. Сыворотку следует хранить в недоступном для детей месте.

Инструкция разработана ФГУП «Орловская биофабрика»
Организация-производитель: ФГУП «Орловская биофабрика»

302501, Орловская обл., Орловский р-н, пос. Биофабрика

Рекомендована к регистрации в Российской Федерации ФГУ «ВГНКИ»
Регистрационный номер ПВР-1-5.0/00596
С утверждением настоящей инструкции утрачивает силу инструкция

по применению сыворотки сибиреязвенной преципитирующей, утверждённая Россельхознадзором 30 января 2007 г.